畢業論文

              打賞
              當前位置: 畢業論文 > 醫學論文 >

              T4樣噬菌體WG01尾絲gp37基因改造

              時間:2019-07-20 20:20來源:畢業論文
              發現了噬菌體的另一種宿主譜拓寬方式:WG01 噬菌體通過替換尾絲 gp37 基因,具有了更寬溫度范圍的裂解能力。本實驗提供了一種可以快速改變或拓寬噬菌體宿主譜的方法

              指導教師 張煒 摘要: 噬菌體作為治療制劑主要受限于其宿主譜窄及難以快速篩選出針對特定病原菌的噬菌體。本研究通過將寬譜 T4 樣噬菌體 QL01 的宿主譜決定基因替換給窄譜 T4 樣噬菌體WG01,使窄譜噬菌體 WG01 獲得寬譜噬菌體 QL01 的宿主譜范圍,達到拓寬宿主譜的目的。實驗結果顯示,替換尾絲 gp37 直接引發了 WG01 宿主譜的擴寬,改造后的 WG01(WG01qlT)可以裂解 113 株大腸桿菌中的 46 株菌,相比未改造前增加了 24 株。在WG01qlT 的子代突變株中,WG01qlT10 宿主譜最寬,可以裂解 113 株菌中的 52 株菌。另外,我們也發現了噬菌體的另一種宿主譜拓寬方式:WG01 噬菌體通過替換尾絲 gp37 基因,具有了更寬溫度范圍的裂解能力。本實驗提供了一種可以快速改變或拓寬噬菌體宿主譜的方法。 37269
              畢業論文關鍵詞:  T4 樣噬菌體;尾絲 gp37;基因改造
              Modification of tail fiber gp37 in T4-like phage WG01
              Abstract: Phage as a therapeutic agent is mainly limited by its narrow range of the host and it is difficult to quickly seek out phage for specific pathogens.  In this study,  the determinant gene of host range in T4-like phage QL01 was  replaced to  the narrow-spectrum T4-like phage WG01, and WG01 was obtained to broaden the host range. The results showed that replacement of the tail  fiber gp37 directly widen the WG01 host range. The  modified WG01 (WG01qlT) could  lyse  46 of 113  strains  of  E. coli, compared with 24 strains before modification. In the WG01qlT offspring, WG01qlT10 has the widest host range, which can lyse 52 of 113 strains. In addition, we also found another way of expanding the host range: WG01 phage via replacing the tail fiber gp37 gene, obtained a wider temperature range of cleavage capacity. This study provides a way to rapidly alter or broaden the phage host range. 源`自^六;維'論.文;網www.kj9998.cn
              Key words:T4-like phages; tail fiber gp37; gene modification
              目 錄
               摘要    1
              關鍵字  .  1
              Abstract  ..  1
              Key words  .  1
              引言    1
              1 材料與方法  .  3
              1.1 材料   3
              1.1.1 常用儀器及設備  .  3
              1.1.2 常用生化材料及試劑    4
              1.2 方法    4
              1.2.1 菌株,噬菌體及培養方法  ..  4
                 1.2.1.1 菌株培養法  ..  4
                 1.2.1.2 噬菌體的培養方法及保存  ..  4
              1.2.2 WG01 gp37 改造質粒的構建    4
                 1.2.2.1 比較基因組學分析  ..  4
                 1.2.2.2 引物設計  .  4
                 1.2.2.3 PCR 擴增反應   5
                 1.2.2.4 PUC118 載體雙酶切 .  5
                 1.2.2.5 連接  ..  5
                 1.2.2.6 轉化  ..  6
                 1.2.2.7 菌落 PCR 鑒定    6
                 1.2.2.8 測序鑒定  .  6
              1.2.3 WG01 gp 37 與 QL01 對應部分進行同源重組  .  6
                 1.2.3.1 優化方案  .  6
              1.2.4 WG01 子代重組噬菌體中突變株的分離及鑒定 ..  6
                 1.2.4.1 WG01 子代重組噬菌體尾絲蛋白 PCR 擴增 .  6
                 1.2.4.2 子代重組噬菌體突變株的分離及純化  .  6
              1.2.5 野生株(WG01和 QL01)和 WG01 衍生株噬菌體宿主譜分析    7
                1.2.6 野生株(WG01 和 QL01)和 WG01 衍生株噬菌體生長特性  ..  7
              2 結果與分析  .  7
                2.1 WG01 與 QL01比較基因組學分析   7
                2.2 WG01 子代重組噬菌體的鑒定   7 源`自^六;維'論.文;網www.kj9998.cn
                2.3 WG01 子代重組噬菌體突變株的鑒定   8 T4樣噬菌體WG01尾絲gp37基因改造:http://www.kj9998.cn/yixue/20190720/35999.html
              ------分隔線----------------------------
              推薦內容
              幸运飞艇彩票